Étude DELIGHT
État des lieux du projet
au 5 mai 2024
ARTICLE PUBLIÉ DANS LA REVUE TRANSPLANT INTERNATIONAL
le 8 juillet 2024
projet d’étude “delight”
état des lieux au 27/02/2023
état des lieux au 29/09/2023
état des lieux au 5/05/2024
publication de l’étude “delight”
Étude de l’influence des traitements de désimmunisation sur la réponse immunitaire de patients hyperimmunisés en attente de transplantation rénale
Titre court : DELIGHT
Code promoteur : 38RC22.0399
Promoteur de la recherche : CHU Grenoble-Alpes
Investigateur principal : Dr Johan NOBLE
L’Avis favorable du CPP Nord Ouest IV le 09/02/2022
Mise en place réalisée avec l’équipe investigatrice le 15/05/2023
État avancement : Inclusions terminées, analyses terminées, article rédigé et soumis dans une revue de transplantation rénale : en cours de révision par les pairs avant publication.
Titre de l’article et co-auteurs :
Persistence of glycolysis-dependent alloreactive memory B cells in highly sensitized kidney transplant recipients despite desensitization
Malgré l’utilisation croissante des stratégies de désimmunisation, les patients hyperimmunisés restent à haut risque de rejet médié par les anticorps, suggérant que, même lorsque les anticorps spécifiques au donneur (DSA) sont efficacement enlevés, les lymphocytes B spécifiques mémoires anti-donneur persistent.
Methode: Nous avons inclus 10 receveurs fortement immunisés ayant subi une désimmunisation par plasmaphérèse et une élimination des lymphocytes B (Rituximab) avant une transplantation rénale. Nous avons quantifié les changements dans les DSA (luminex), les sous-populations totales de lymphocytes B (cytométrie en flux), les lymphocytes B anti-HLA spécifiques du donneur (fluorospot) et le métabolisme des sous population de lymphocytes B, avant la désensibilisation, au moment de la transplantation, et à 6 et 12 mois apres la greffe.
Figure 2
Figure 2: Composition des lymphocytes B avant la désimmunisation et jusqu’a 1 and après la transplantation. Lymphocytes B totaux (CD19+CD3-CD14-) (A), lymphocytes B de mémoire (CD19+CD38− CD24+ CD27+) (B), plasmocytes (CD19+CD27hi CD38hi) (C), lymphocytes B naïfs (CD19+CD27– IgD+) (D). Lymphocytes B transitionnels (CD19+ CD27– CD24hi) (E). *P < .05 par test Anova. Les PBMC étaient disponibles pour les 10 patients aux 4 moments.
Figure 4
Figure 4: La désimmunisation ne réduit pas significativement les lymphocytes B mémoires spécifiques au donneur. Différenciation des lymphocytes B mémoires spécifiques au donneur en plasmocytes évaluée par FluoroSpot mesurant les anticorps spécifiques au donneur (spots) et exprimée en nombre moyen de spots par million de PBMC (A) et ratio entre les mBC spécifiques de HLA et les mBC polyclonales totales IgG (B). Les points rouges correspondent aux patients ayant eu un rejet humoral au cours du suivi. *P < .05 par test Anova. Les PBMC étaient également disponibles pour les 10 patients aux 4 moments.
Figure 5
Figure 5: Impact de la désimmunisation et de la transplantation sur le métabolisme des lymphocytes B. Evolution du profil métabolique des sous-populations de lymphocytes B avant la désensibilisation (Pre-D), avant la transplantation (M0), au mois 6 (M6) et au mois 12 (M12) après la transplantation. La valeur P indique l’évolution du pourcentage de métabolisme entre Pre-D et M12. *P < .05 par test de Wilcoxon.
FAO :
oxydation des acides gras ; AAO : oxydation des acides aminés. 4 patients avaient un prélèvement manquant.
Figure 6
Figure 6: L’inhibition de la glycolyse entraîne une diminution significative de la sécrétion d’IgG par les lymphocytes B mémoires activés. Sécrétion d’IgG évaluée par ELISpot chez 5 receveurs de transplantation rénale et exprimée en nombre brut de spots. OXPHOS : phosphorylation oxydative.
Fait à Grenoble, le 5 mai 2024
Dr. Johan NOBLE
ARTICLE PUBLIÉ DANS LA REVUE TRANSPLANT INTERNATIONAL
8 juillet 2024
AVANCEMENT DU PROJET DE RECHERCHE DELIGHT (2022-2023)
Étude de l’influence des traitements de désimmunisation sur la réponse immunitaire de patients hyperimmunisés en attente de transplantation rénale (étude DELIGHT)
Etude DELIGHT publiée dans la revue TRANSPLANT INTERNATIONAL
Glycolysis Changes in Alloreactive Memory B Cells in Highly Sensitized Kidney Transplant Recipients Undergoing Desensitization Therapy
État des lieux du projet DELIGHT au 29 septembre 2023
1- Analyses sur PBMC de 10 patients à 4 temps
avant désimmunisation, T1 le jour de la transplantation rénale, T2 à M3 post greffe et T4 à M12 post greffe 2- Analyse en cytométrie de flux : Objectif : quantification de la population B-mémoire, Plasmablastes, B naifs et B transitionnels (Cf figure1) aux 4 temps pour chaque patient.
3- Analyses en ELISPot B anti-HLA, B anti BKV et T anti CMV, EBV et BK pour l’analyse de la réponse anti HLA et anti virale aux 4 temps pour chaque patient (40 tests)
4- Analyse métabolisme par méthode SCENITH (cf Figure 3)
État des lieux du projet DELIGHT au 27 février 2023
Cohorte prospective :
Projet DELIGHT prospectif avec analyses échantillon sanguin, médullaires et ganglionnaire de patients hyperimmunisés :
Dépôt du dossier au CPP le 13 décembre 2022
Les étapes prévues du projet DELIGHT
Étape 1 (2023)
Dépôts du projet à la délégation de la recherche clinique et innovation (DRCI) pour accords du CPP et aide méthodologique
Étape 2 (2023 - 2024)
Récupération des échantillons, finalisation du RIPH prospectif et dépôt au CPP, explorations mécanistiques.
Étape 3 (2024 - 2026)
Réalisation des analyses de recherche à l’IAB (Institut for Advanced Biosciences) de Grenoble et publications des résultats.
